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    上海研域生物實驗室所需哪些免疫組化

    發(fā)布時間: 2017-06-21  點擊次數(shù): 1533次

    免疫組化實驗試劑

    PBS緩沖液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L.

    0.01mol/L檸檬酸鹽緩沖液(CB,pH6.0,1000ml):檸檬酸三鈉 3g,檸檬酸 0.4g.

    0.5mol/L EDTA緩沖液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10 mmol/L NaOH調(diào)至pH8.0,加水至1000ml.

    1mol/L的TBS緩沖液(pH8.0):在800ml水中溶解121gTris堿,用1N的HCl調(diào)至pH8.0,加水至1000ml.

    酶消化液: a、0.1%胰蛋白酶液:用0.1%CaCl2(pH7.8) 配制。 b、0.4%胃蛋白酶液:用0.1N的HCl配制。

    3%甲醇-H2O2溶液:用30%H2O2和80%甲醇溶液配制。

    封裱劑:

    甘油和0.5mmol/L碳酸鹽緩沖液(pH9.0~9.5)等量混合

    油和TBS(或PBS)配制

    TBS/PBS pH9.0~9.5,適用于熒光顯微鏡標(biāo)本;pH7.0~7.4適合于光學(xué)顯微鏡標(biāo)本

    免疫組化實驗操作流程:

    脫蠟和水化

    脫蠟前,應(yīng)將組織芯片在室溫中放置60分鐘或60℃恒溫箱中烘烤20分鐘。

    組織芯片置于二甲苯中浸泡10分鐘,更換二甲苯后再浸泡10分鐘;

    無水乙醇中浸泡5分鐘

    95%乙醇中浸泡5分鐘

    70%乙醇中浸泡5分鐘

     

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